In tutte le specie di tartarughe la differenziazione sessuale è poco evidente. Esistono tuttavia alcune caratteristiche generali in base alle quali è possibile distinguere i maschi dalle femmine nei soggetti adulti (in quelli giovani distinguere i sessi non è possibile) ma si tratta di differenze così poco evidenti che possono essere rilevate per lo più solo con attento esame comparativo diretto.
Nelle tartarughe acquatiche il maschio presenta le unghie delle zampe anteriori più lunghe di quelle della femmina.
Nelle tartarughe terrestri i maschi hanno le unghie anteriori più robuste e più incurvate.
La parte superiore della corazza - il carapace - nei soggetti di sesso maschile è più bassa, con la piastra sopracaudale molto sporgente.
La parte inferiore della corazza - il piastrone - nei maschi è generalmente curvata leggermente all'indentro mentre nelle femmine è invece lievemente incurvata all'infuori.
Le code dei maschi sono più lunghe e sottili.
Nei maschi l'apertura anale è situata più indietro che non nei soggetti di sesso femminile.